嗜热厌氧乙醇杆菌α-葡萄糖苷酶基因的表达及酶学性质的研究 |
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引用本文: | 王月宏,段作营,邵蔚蓝,李华钟.嗜热厌氧乙醇杆菌α-葡萄糖苷酶基因的表达及酶学性质的研究[J].工业微生物,2010,40(6):60-64. |
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作者姓名: | 王月宏 段作营 邵蔚蓝 李华钟 |
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作者单位: | 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,无锡,214063 2. 南京师范大学生命科学院,南京,210046 |
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摘 要: | 用PCR方法从嗜热厌氧乙醇杆菌(Thermoanaerobacter ethanolicus)JW200中扩增出编码a-葡萄糖苷酶的基因,将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pTrc99A上并获得表达a-葡萄糖苷酶的大肠杆菌重组菌。重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测出蛋白相对分子量约89kDa,经阴离子交换层析和凝胶层析纯化后的a-葡萄糖苷酶最适反应温度为70℃,最适反应pH为5~5.5,且在pH 5.5~6.5之间有较高的稳定性。重组a-葡萄糖苷酶在70℃下105 min后酶活仍达到80%。
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关 键 词: | 嗜热厌氧乙醇杆菌 α-葡萄糖苷酶 重组表达 酶学性质 |
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