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人肺巨细胞癌蛋白质组的二维电泳和计算机图象分析
作者姓名:万晶宏  罗凌  钱小红  郭尧君  邱宗荫  陆应麟  贺福初
作者单位:1. 军事医学科学院放射医学研究所北京 100850;重庆医科大学重庆 400016
2. 军事医学科学院放射医学研究所北京 100850
3. 中国科学院生物物理研究所北京 100101
4. 重庆医科大学重庆 400016
基金项目:国家重点基础研究项目(39990600-02)和国家自然科学基金重大项目(G1998051213)部分资助
摘    要:为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术 ,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质 ,以人肺巨细胞癌 (PLA- 80 1 - D、C)高、低转移株作为研究对象 ,应用 IPG-phor进行第一向等电聚焦 ,随后 ,在 Protein IPG conversion Kit上进行垂直 SDS- PAGE的分离 .利用光密度仪对银染的凝胶扫描 ,通过 PDQuest软件进行蛋白斑点检测和配比 .结果表明 :(1 )应用 IPGphor,采用样品直接加入重泡胀溶液的形式 ,增大了溶解性 ,缩短聚焦时间、增大样品负荷量 (分析型 ) ,提高了分辨率 .(2 )比较宽 (p H=3~ 1 0 L)、窄 (p H=4~ 7L)范围 IPG胶条 ,窄 p H范围的 IPG胶条具有较高的分辨率 .(3)比较 PLA- 80 1 - C、D细胞蛋白图谱之间的差异 ,其相关系数为 0 .7339± 0 .0 2 91 ;仅在 PLA- 80 1 - C株出现的蛋白为 1 79个 .

关 键 词:蛋白质组  二维电泳  固相pH梯度  图象分析  
收稿时间:2000-12-20
修稿时间:2000-01-14
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