| 乳酸乳球菌fabZ1和fabZ2基因功能的鉴定 |
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| 作者姓名： | 马金成 罗彪 胡喆 王海洪 |
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| 作者单位： | 华南农业大学生命科学学院,广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,广州510642,华南农业大学生命科学学院,广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,广州510642,华南农业大学生命科学学院,广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,广州510642,华南农业大学生命科学学院,广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,广州510642 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31200028),高等学校博士学科点专项科研基金(20104404110005)和广东高校优秀青年创新人才培养计划(LYM10038)资助项目 |
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| 摘 要： | 大肠杆菌(Escherichia coli)是Ⅱ型脂肪酸合成系统的模式生物,3-羟基脂酰ACP脱水异构酶(FabA)是不饱和脂肪酸合成中的关键酶.生物信息学分析表明,乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的基因组中没有标注为3-羟基脂酰ACP脱水异构酶的基因,但有两个标注为3-羟基脂酰ACP脱水酶基因LlfabZ1和LlfabZ2,其编码的蛋白质与EcFabZ的相似性分别为41%和45.1%,且都具有3-羟基脂酰ACP脱水酶两个保守的α螺旋结构.用携带LlfabZ1和LlfabZ2的质粒载体遗传互补大肠杆菌fabA温度敏感突变株CY57,在42℃下不能恢复生长,但无细胞抽提物的结果显示LlFabZ1能够使反-2-癸烯酰ACP异构成顺-3-癸烯酰ACP,而LlFabZ2则不能.互补大肠杆菌fabZ突变株HW7显示,在诱导的条件下,含有LlfabZ2的转化子能够恢复生长,而LlfabZ1则不能.体外重建脂肪酸合成反应及蛋白质活性测定表明,LlFabZ1具有3-羟基脂酰ACP脱水异构酶功能,而LlFabZ2只具有3-羟基脂酰ACP脱水酶功能.另外,未得到LlfabZ1和LlfabZ2的突变株,表明LlFabZ1和LlFabZ2可能是乳酸乳球菌脂肪酸合成酶系中的必不可少的关键蛋白.上述结果证实了乳酸乳球菌fabZ1和fabZ2两个基因在脂肪酸合成中的功能.
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| 关 键 词： | 乳酸乳球菌 细菌脂肪酸合成 -羟基脂酰ACP脱水异构酶 -羟基脂酰ACP脱水酶 |
| 收稿时间： | 2014-01-27 |
| 修稿时间： | 2014-04-28 |
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