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| 猪A组轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 王春凤 丛彦龙 刘尚高 李玉. 猪A组轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达[J]. 微生物学报, 2005, 45(5): 685-689 |
| 作者姓名： | 王春凤 丛彦龙 刘尚高 李玉 |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学动物科学与技术学院,长春,130118 2. 中国农业大学动物医学院,北京,100094 3. 吉林农业大学菌物研究所,长春,130118 |
| 基金项目： | 国家“863计划”(2003AA241121002)，国家自然科学基金(30200199)，吉林省科技厅项目(20020220)，吉林省杰出青年基金(20030118)，中国博士后科学基金项目(2002031156)，吉林农业大学青年教师启动基金(2002-QQN-002)~~ |
| 摘 要： | 以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-TVector中,构建克隆质粒pGEM-T-Vp6。用SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp6和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp6基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp6。将pW425t-Vp6转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coliX13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆,通过SDS-PAGE分析,可见约44.88kD的融合蛋白。由Western blot分析,表明该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,从而为pW425t-Vp6在乳酸菌受体菌株中表达提供理论基础和实验依据。 |
| 关 键 词： | 轮状病毒 Vp6基因 乳酸菌表达载体 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 0001-6209（2005）05-0685-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-20 |
| 修稿时间： | 2005-06-30 |
Expression of recombinant Vp6 gene of porcine rotavirus A with non-antibiotic Lactobacillus vector in Escherichia coli |
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| WANG Chun-feng,CONG Yan-long,LIU Shang-gao,LI Yu. Expression of recombinant Vp6 gene of porcine rotavirus A with non-antibiotic Lactobacillus vector in Escherichia coli[J]. Acta microbiologica Sinica, 2005, 45(5): 685-689 | |
| Authors: | WANG Chun-feng CONG Yan-long LIU Shang-gao LI Yu |
| Affiliation: | 1. College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;2. College of Aninuzl Medicine, China Agricultural University, Beijing 100094, China;3.Institute of Mycology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Rotavirus Vp6 gene Lactobacillus vector Escherichia coli X13 |
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