| 尼罗罗非鱼ZAP-70蛋白的原核表达、纯化及其多抗制备 |
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| 引用本文： | 潘传燕,冯鹏霏,林勇,罗洪林,张永德,苏乾莲.尼罗罗非鱼ZAP-70蛋白的原核表达、纯化及其多抗制备[J].生物技术,2019(1):16-22. |
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| 作者姓名： | 潘传燕 冯鹏霏 林勇 罗洪林 张永德 苏乾莲 |
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| 作者单位： | 广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室;广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31372553;31760765);广西自然科学基金项目(2015GXNSFAA139070);广西重点研发计划项目(桂科AB16380074) |
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| 摘 要： | 目的]构建尼罗罗非鱼ZAP-70原核表达载体,纯化其重组蛋白并制备多克隆抗体。方法]采用无缝克隆技术构建尼罗罗非鱼ZAP-70重组表达载体,并转入大肠杆菌B21中诱导表达,将表达的ZAP-70蛋白免疫日本大耳兔得到多克隆抗体,采用Western Blotting和ELISA技术鉴定抗体的特异性和效价。结果]成功构建原核表达重组质粒p ET-B2m-ZAP-70,诱导表达的重组蛋白分子量约为39 k Da,主要以包涵体的形式表达;获得效价为1∶512 000的多克隆抗血清,WB检测显示该抗体能够特异性的识别所表达的ZAP-70重组蛋白。结论]尼罗罗非鱼ZAP-70重组质粒在大肠杆菌B21中高效表达,分子量约为39 k Da,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步探索ZAP-70在尼罗罗非鱼免疫系统中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 ZAP-70 原核表达 多克隆抗体 免疫印迹 |
Prokaryotic expression and purification of ZAP-70 protein,preparation of polyclonal antilbody in Nile Tilapia( Oreochromis niloticus) |
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| PAN Chuan-yan,FENG Peng-fei,LIN Yong,LUO Hong-lin,ZHANG Yong-de,SU Qian-lian.Prokaryotic expression and purification of ZAP-70 protein,preparation of polyclonal antilbody in Nile Tilapia( Oreochromis niloticus)[J].Biotechnology,2019(1):16-22. |
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| Authors: | PAN Chuan-yan FENG Peng-fei LIN Yong LUO Hong-lin ZHANG Yong-de SU Qian-lian |
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| Institution: | (Guangxi Academy of Fishery Sciences,Guangxi Key Laboratory of Aquatic Genetic Breeding and Healthy Aquaculture,Nanning 530021,China;Guangxi Veterinary Institute Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Nanning 530001) |
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| Abstract: | PAN Chuan-yan;FENG Peng-fei;LIN Yong;LUO Hong-lin;ZHANG Yong-de;SU Qian-lian(Guangxi Academy of Fishery Sciences,Guangxi Key Laboratory of Aquatic Genetic Breeding and Healthy Aquaculture,Nanning 530021,China;Guangxi Veterinary Institute Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Nanning 530001) |
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| Keywords: | Nile tilapia ZAP-70 prokaryotic expression polyclonal antibody Western Blotting |
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