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双向热循环消减-SELEX方法筛选肝癌血清核酸适配体
作者姓名:曾家豫  张蕾  翟蒙  许金苓  袁红霞  王维君  陈聪盈  田彩平  廖世奇
作者单位:(1)西北师范大学生命科学学院,兰州 730070; 2)甘肃省医学科学研究院医学分子生物学研究中心,兰州 730070)
基金项目:国家自然科学基金(No.81560346,No.81360333),2017甘肃省卫生行业科研计划(No.GSWSKY2017-06)和甘肃省科技计划(No.18JR3RA065和18JR3RA061) 资助
摘    要:肝癌位于我国肿瘤死亡率第2位,生存率较低。目前用于肝癌早期诊断的临床检查及血清肿瘤标志物检测的特异性与敏感性均较低,不能满足肝癌早期诊断和治疗的需要。核酸适配体与靶标分子结合的灵敏度高、特异性强,有巨大的临床诊断和治疗应用前景。本文利用双向热循环消减指数富集的配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX)技术,分别以肝癌血清和健康人血清为靶标,经过19轮筛选,获得了肝癌血清特异性核酸适配体序列1 000余条,以及健康人血清特异性核酸适配体序列1 000余条,并从中各挑取了1条高丰度适配体序列,分别命名为Tc1和Tn1。采取了50例肝癌病人血清和50例健康人血清,对适配体Tc1和Tn1与靶标血清的结合特异性进行了检测。结果显示,Tc1和Tn1对两种靶标血清的检出率分别为92%和94%。说明Tc1可特异性与肝癌血清结合,Tn1可特异性与健康人血清结合。肝癌血清特异性核酸适配体的筛选获得,将为建立基于核酸适配体的肝癌血清检测新方法奠定基础。

关 键 词:琼脂磁珠   指数富集的配基系统进化   肝癌血清   核酸适配体  
收稿时间:2019-04-26
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