| 通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究 |
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| 引用本文： | 周杰,罗娜,宁叶,施定基,俞梅敏,茹炳根.通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究[J].生物化学与生物物理进展,2002,29(1). |
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| 作者姓名： | 周杰 罗娜 宁叶 施定基 俞梅敏 茹炳根 |
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| 作者单位： | 周杰,罗娜,宁叶,俞梅敏,茹炳根(北京大学生命科学学院,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京,100871);施定基(中国科学院植物研究所,北京,100093) |
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| 摘 要： | 用PCR方法从海洋单细胞蓝藻聚球藻7002(Synechococcus sp. PCC 7002)基因组DNA中扩增得到藻蓝蛋白β亚基基因(cpcβ)的上游序列(Pcpcβ),及编码谷氨酰胺合成酶的glnA基因片段.以Pcpcβ作为启动子、以glnA基因片段作为整合平台,构建含有小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)cDNA的同源整合表达载体pKGC-MT.通过自然转化法将整合表达载体导入聚球藻7002中,经氨苄青霉素筛选,得到遗传性状稳定的转基因藻.PCR检测证明mMT-Ⅰ基因已整合到蓝藻基因组DNA上;蛋白质印迹表明mMT-Ⅰ已在蓝藻中表达;ELISA结果显示mMT-Ⅰ在蓝藻中的表达量约为800 μg/g.
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| 关 键 词： | 小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 启动子Pcpcβ glnA整合平台 聚球藻7002 同源重组 |
Expression of Mouse Metallothionein-Ⅰ Gene in Synechococcus sp. PCC 7002 by Homologous Recombination |
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