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家蚕磷酸吡哆醇氧化酶基因的表达谱分析
引用本文:葛俊楠,张剑韵,黄龙全.家蚕磷酸吡哆醇氧化酶基因的表达谱分析[J].昆虫学报,2011,54(8):877-880.
作者姓名:葛俊楠  张剑韵  黄龙全
作者单位:1. 安徽农业大学茶与食品科技学院,合肥,230036
2. 安徽农业大学生命科学学院,合肥,230036
基金项目:国家自然科学基金项目(30870338)
摘    要:【目的】了解家蚕Bombyx mori维生素B6关键代谢酶磷酸吡哆醇氧化酶(pyridoxine- 5′-phosphate oxidase, PNPO)基因在家蚕不同发育阶段及5龄幼虫不同组织中的表达差异。【方法】将家蚕PNPO基因的重组表达质粒pET-22b(+)-PNPO转化入大肠杆菌Escherichia coli Rosetta中诱导表达, 纯化蛋白制备多克隆抗体。分别采用荧光定量PCR和Western blot方法对家蚕PNPO基因进行了转录水平和翻译水平的表达分析。【结果】在家蚕发育水平上, 5龄幼虫的PNPO翻译量为最高。PNPO基因在5龄幼虫各组织中的转录水平由高到低依次为精巢、 头、 中肠、 马氏管、 卵巢、 表皮、 脂肪体、 丝腺; 翻译量也以精巢为最高, 其次是头、 中肠和马氏管。【结论】明确了PNPO在家蚕各发育阶段及5龄幼虫各组织中的表达情况。

关 键 词:家蚕    磷酸吡哆醇氧化酶    Western  blot    荧光定量PCR  表达谱  
收稿时间:2011-05-20;

Expression profiling of pyridoxine 5′-phosphate oxidase gene in Bombyx mori
GE Jun-Nan,ZHANG Jian-Yun,HUANG Long-Quan.Expression profiling of pyridoxine 5′-phosphate oxidase gene in Bombyx mori[J].Acta Entomologica Sinica,2011,54(8):877-880.
Authors:GE Jun-Nan  ZHANG Jian-Yun  HUANG Long-Quan
Institution:GE Jun-Nan1,ZHANG Jian-Yun2,HUANG Long-Quan1,(1. College of Tea and Food Science,Anhui Agricultural University,Hefei 230036,China,2. College of Life Science,China)
Abstract:Aim] The expression profile of gene encoding pyridoxine phosphate oxidase(PNPO) ,which is a key enzyme related to VB6 metabolism,was analyzed in different developmental stages and tissues of the 5th instar larvae of Bombyx mori. Methods] The recombinant plasmid pET-22b(+) -PNPO was transformed to Escherichia coli Rosetta for induction,expression and purification of PNPO,and then the polyclonal antibody was prepared. The expression profile of PNPO gene was analyzed by Real-time PCR and Western blot,respect...
Keywords:Bombyx mori" target="_blank">Bombyx mori')" href="#">Bombyx mori  pyridoxine 5′-phosphate oxidase  Western blot  real-time PCR  expression profile
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