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芋ISSR-PCR扩增反应体系的建立
引用本文:董红霞,钟兰,王芸,黄新芳,孙亚林,刘玉平,刘义满,柯卫东. 芋ISSR-PCR扩增反应体系的建立[J]. 生物技术, 2012, 22(5)
作者姓名:董红霞  钟兰  王芸  黄新芳  孙亚林  刘玉平  刘义满  柯卫东
作者单位:武汉市蔬菜科学研究所,湖北武汉,430065
基金项目:国家科技支撑计划项目,湖北省自然科学基金项目
摘    要:目的:获得清晰可靠、重复性较好的ISSR-PCR扩增反应体系,应用于芋种质资源进行遗传多样性的研究中.方法:以芋的幼叶提取基因组DNA为材料,采用正交试验设计L16(45),从模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度及TaqDNA聚合酶的用量5因素4水平出发,构建芋最佳反应体系.结果:芋ISSR-PCR的最佳反应体系为:在25μl的反应体系中,40ng DNA模板、0.4μmol/L引物浓度、2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1 U Taq DNA聚合酶.结论:利用芋种质资源对最佳反应体系的验证,结果显示该反应体系具有扩增稳定性.

关 键 词:  ISSR  反应体系  遗传多样性

Establishment ISSR-PCR Reaction System for Taro
DONG Hong-xia , ZHONG Lan , WANG Yun , HUANG Xin-fang , SUN Ya-lin , LIU Yu-ping , LIU Yi-man , KE Wei-dong. Establishment ISSR-PCR Reaction System for Taro[J]. Biotechnology, 2012, 22(5)
Authors:DONG Hong-xia    ZHONG Lan    WANG Yun    HUANG Xin-fang    SUN Ya-lin    LIU Yu-ping    LIU Yi-man    KE Wei-dong
Abstract:
Keywords:
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