| 人间隙连接蛋白 31 相互作用蛋白Annexin Ⅱ的筛选与证实 |
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| 引用本文： | 刘 宇,贺力强,谭志平,唐程远,迟静薇,蔡 芳,潘 乾,龙志高,梁德生,邬玲仟,戴和平,夏 昆,张灼华,夏家辉.人间隙连接蛋白 31 相互作用蛋白Annexin Ⅱ的筛选与证实[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(6):501-507. |
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| 作者姓名： | 刘 宇 贺力强 谭志平 唐程远 迟静薇 蔡 芳 潘 乾 龙志高 梁德生 邬玲仟 戴和平 夏 昆 张灼华 夏家辉 |
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| 作者单位： | 中南大学医学遗传学国家重点实验室,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目（973）（2001CB510302），国家高技术“863”计划资助项目（2002BA711A07）和国家自然科学基金资助项目（30370737；30123006）. |
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| 摘 要： | 间隙连接蛋白 31 (connexin31 ， Cx31) 是间隙连接蛋白 (connexin) 家族的一员，目前对于 Cx31 的功能及其调节方式知之甚少 . 采用固相多肽合成的方法合成 Cx31 羧基端一个多肽片段 (250~266) ，经 HPLC 纯化后偶联到匙孔血蓝蛋白，免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗 Cx31 的抗体 . 运用制备的抗 Cx31 多克隆抗体免疫沉淀， SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 分离，蛋白质条带回收，蛋白质胶块酶解， Q-TOF 质谱分析，数据库扫描筛选可能相互作用蛋白，运用抗体 pull-down 实验，筛选到可能相互作用蛋白 annexin Ⅱ，经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实 annexin Ⅱ与 Cx31 相互作用 .
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| 关 键 词： | 间隙连接蛋白 31 ，抗体蛋白质相互作用， annexin Ⅱ，免疫共沉淀，免疫共定位 |
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