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基因拷贝数和甲醇浓度对重组毕赤酵母产华根霉脂肪酶的影响
作者姓名:李飞  喻晓蔚  沙冲  徐岩
作者单位:江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室,江苏无锡,214122
基金项目:国家863 计划重点项目(No. 2010AA101501, 2008AA10Z304); 国家自然科学基金项目(No. 20802027); “十一五”支撑计划项目(No. 2008BAI63B07)
摘    要:将华根霉脂肪酶基因克隆到甲基营养型毕赤酵母中表达,以甲醇利用快型菌株为宿主,在7 L发酵罐水平对脂肪酶基因拷贝数分别为3、5、6的3株基因重组菌——XY RCL-3、XY RCL-5、XY RCL-6进行高密度发酵调控,同时研究了甲醇浓度对表达华根霉脂肪酶的影响。结果表明,XY RCL-5在相同条件下发酵产酶能力高于XY RCL-6和XY RCL-3,最适甲醇诱导浓度控制在0.1%±0.02%时,酶活可达到12 500 U/mL,菌体干重达到204 g/L,蛋白浓度也能达到8.02 g/L。

关 键 词:基因拷贝数  甲醇诱导浓度  毕赤酵母  华根霉脂肪酶
收稿时间:2010-09-09
修稿时间:2010-12-17
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