大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化

对重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—csF)高效表达克隆pzw．GM的表达产物进行了纯化，并对纯化的人GM—CSF进行了N端氨基酸序列分析。人GM—CSF基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换一系列纯化步骤，终产物纯度达99％，按蛋白总量计算回收率达10％，比活性达1×10⁷／mg蛋白质。通过测定纯化人GM—csF的N端l 6个氨基酸序列，与由其DNA序列推导的氮基酸序列完全一致，为大批量重组人GM—CSF的生产创造了条件。