| 缺失nifE的棕色固氮菌突变种MoFe蛋白的纯化及体外激活 |
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| 引用本文： | 赵剑峰,赵颖,汪志平,吕玉兵,潜中兴,黄巨富.缺失nifE的棕色固氮菌突变种MoFe蛋白的纯化及体外激活[J].Acta Botanica Sinica,2003,45(7):815-819. |
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| 作者姓名： | 赵剑峰 赵颖 汪志平 吕玉兵 潜中兴 黄巨富 |
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| 作者单位： | [1]中国科学院植物研究所光合与环境分子生理学重点实验室，北京100093 [2]浙江大学原子核农业研究所，杭州310029 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(“973”项目001CB1089-06)，国家自然科学基金(3027029)，国家载人航天工程 |
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| 摘 要： | 经DEAE纤维素、Sephacryl S-300和Q．Sepharose柱层析分离纯化，从缺失nifE的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种(DJ35)的无细胞粗提物中得到AnilE MoFe蛋白(△nilE Av1)。SDS凝胶电泳分析表明，△nilE Av1的亚单位种类和分子量分别与棕色固氮菌野生型(OP)MoFe蛋白(Av1)的α和β亚单位相似。当与固氮酶Fe蛋白(Av2)活性互补时，△nifE Av1不具有还原质子的能力，但从0P Av1中抽提的FeMoco却可使其激活。经过量的邻菲哕啉(o-phen)厌氧处理并经Sephadex G-25柱层析分离后，便得到△nilE Av1@。在同时存在Av2和MgATP发生系统的条件下，△nilE Av1@，而不是△nilE Av1，可为由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S、Na2S2O4和二硫苏糖醇组成的含Mn重组液(Rs-Mn)显著激活。但在缺少MgATP或Av2的条件下，RS-Mn则不能激活△nilE Av1@。这就表明，RS-Mn对△nilE Av1@的激活需要o-phen的预先处理及同时存在Av2和MgATP的这二个条件。
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| 关 键 词： | nifE 棕色固氮菌 突变种 MoFe蛋白 纯化 体外激活 |
Purification and Activation In Vitro of MoFe Protein from a nifE Deleted Mutant Strain of Azotobacter vinelandii |
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| Authors: | ZHAO Jian-Feng ZHAO Ying WANG Zhi-Ping LU Yu-Bing QIAN Zhong-Xing HUANG Ju-Fu |
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