| FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 郑佐华,周宗祥,朱蔚,殷长传,季朝能,毛裕民.FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(2):170-174. |
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| 作者姓名： | 郑佐华 周宗祥 朱蔚 殷长传 季朝能 毛裕民 |
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| 作者单位： | 复旦大学遗传所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,上海市科委重点项目（FD耐热逆转录酶及肝炎病毒系列基因诊断方法研究）资助 |
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| 摘 要： | ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温，最适反应温度在６５～７５℃左右，这时ＲＮＡ的高级结构能解开，可以提高逆转录反应的效率；同时引物和ＲＮＡ模板识别的专一性强，可大大提高逆转录的特异性．实验表明ＦＤ－ＴＲＴ逆转录反应的最适条件为：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．８，１５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４，１００μｇ／ｍｌ明胶，５００μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，２５ｐｍｏｌ逆转录引物，１ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２，２ＵＦＤ耐热逆转录酶，反应在６５～７０℃下进行．在上述条件下，用ＲＴ－ＰＣＲ可检出少于５ｐｇ外周血总ＲＮＡ中特异的α珠蛋白ｍＲＮＡ．
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| 关 键 词： | 逆转录酶 耐热 逆转录PCR RNA |
| 收稿时间： | 1998-04-20 |
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