不同预处理方法影响昆虫干标本DNA提取效果 |
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引用本文: | 李枷霖,郑斯竹,蔡平,詹国辉,高渊.不同预处理方法影响昆虫干标本DNA提取效果[J].基因组学与应用生物学,2015(2):396-402. |
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作者姓名: | 李枷霖 郑斯竹 蔡平 詹国辉 高渊 |
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作者单位: | 苏州出入境检验检疫局;苏州大学金螳螂建筑与城市环境学院 |
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基金项目: | 国家“十二五”科技支撑计划课题(2012BAK11B03);国家质检总局科技项目(2014IK023);江苏出入境检验检疫局科技项目(2013KJ55)共同资助 |
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摘 要: | 为从昆虫干标本中获取高质量DNA,以利于后期PCR扩增目的基因,本研究对DNA提取前昆虫干标本的预处理方法进行探讨,分别测定其纯度和质量,并用不同引物进行了扩增效果对比。结果显示:经过预处理的样品DNA平均含量均高于CK的52.283 ng/滋L,最高为0.9%Na Cl处理3 h,平均含量达122.632 ng/滋L;米象4种预处理方法提取的DNA利用引物Lco1490/Hco2198及UEA7/UEA10均能扩增出650 bp长度条带,仅有0.9%Na Cl溶液浸泡3 h处理的米象可通过引物J173/J1331扩增出1 000 bp的长片段条带。研究表明,经过预处理后,一定程度上减少了基因组DNA的断链,主要对样品DNA的质量浓度影响显著;以9%Na Cl溶液3 h预处理后的昆虫干标本,利用磁珠法所提DNA的质量及PCR扩增效果最佳。
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关 键 词: | 昆虫干标本 预处理 磁珠法 DNA提取 PCR扩增 |
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