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嗜酸氧化亚铁硫杆菌APS还原酶的表达、纯化及其性质鉴定
引用本文:郑春丽,张燕飞,吴安娜,戴云杰,张晓键,柳建设.嗜酸氧化亚铁硫杆菌APS还原酶的表达、纯化及其性质鉴定[J].现代生物医学进展,2009,9(5).
作者姓名:郑春丽  张燕飞  吴安娜  戴云杰  张晓键  柳建设
作者单位:1. 中南大学资源加工与生物工程学院,湖南,长沙,410083;内蒙古科技大学生物与化学工程学院,内蒙古,包头,014010
2. 中南大学资源加工与生物工程学院,湖南,长沙,410083
3. 东华大学环境学院,上海,201620;中南大学资源加工与生物工程学院,湖南,长沙,410083
基金项目:,国家重点基础研究发展规划(973计划),国家自然科学基金创新研究群体资助项目,教育部全国优秀博士学位论文作者专项基金,国家自然科学基金
摘    要:嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)中APS还原酶是硫同化途径的一个关键酶,其对硫酸盐的还原及硫化物的氧化具有重要调节作用.本文以A.ferrooxidans ATCC23270基因组为模板.通过PCR扩增得到编码APS还原酶的cysH基因,与原核表达载体pLM l构建重组体,转化入大肠杆茵(Escherichia coli,E.coli)DH5a中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的APS还原酶.由蛋白颜色和紫外分析,确定其含有一个Fe4S4]簇作为活性中心.表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为28 kD.酶活测定表明其具有将APS还原为亚硫酸盐跟AMP的功能.

关 键 词:嗜酸氧化亚铁硫杆菌  APS还原酶  cysH  克隆  表达  纯化

Exoression,Purification,and Characterization of APS Reductase from Acidithiobacillus ferrooxidans
ZHENG Chun-li,ZHANG Yan-fei,WU An-na,DAI Yun-jie,ZHANG Xiao-jian,LIU Jian-she.Exoression,Purification,and Characterization of APS Reductase from Acidithiobacillus ferrooxidans[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(5).
Authors:ZHENG Chun-li  ZHANG Yan-fei  WU An-na  DAI Yun-jie  ZHANG Xiao-jian  LIU Jian-she
Abstract:
Keywords:
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