| 腺病毒介导犬干扰素-γ基因的表达及其体外抗犬细小病毒的作用 |
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| 引用本文： | 张考,靳慧君,仲飞,李秀锦,能昌爱,陈慧慧,李文艳,温洁霞.腺病毒介导犬干扰素-γ基因的表达及其体外抗犬细小病毒的作用[J].微生物学报,2012,52(11):1340-1407. |
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| 作者姓名： | 张考 靳慧君 仲飞 李秀锦 能昌爱 陈慧慧 李文艳 温洁霞 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学动物医学院基础兽医部,农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站,河北省兽用生物制品工程技术研究中心,保定071001
2. 燕山大学环境与化学工程学院生物工程系,秦皇岛,066004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30771586);河北省自然科学基金(C2008000244) |
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| 摘 要： | 目的]构建含犬干扰素-γ(c IFN-γ)基因的重组腺病毒,并在培养的犬肾细胞MDCK中分析其抗犬细小病毒的活性.方法]首先将cIFN-γcNDA基因克隆到腺病毒穿梭质粒中,构建成含cIFN-γ基因的腺病毒穿梭质粒pShuttle3-cIFN-γ.利用特异的酶切位点,通过直接连接法将cIFN-γ表达盒插入到腺病毒基因组质粒pAdeno-X中,构建成含cIFN-γ基因的腺病毒基因组质粒pAd-cIFN-γ.pAd-cIFN-γ质粒经酶切线性化后转染人胚胎肾细胞HEK293T,在细胞中拯救出含有cIFN-γ基因的复制缺陷型重组腺病毒.然后用该重组腺病毒处理(感染)培养的犬肾细胞MDCK,再用犬细小病毒感染重组腺病毒处理的细胞,分析重组腺病毒在体外抗犬细小病毒的活性.结果]通过连接法构建了含cIFN-γ基因的重组腺病毒,构建的重组腺病毒能够介导cIFN-γ在MDCK细胞中进行分泌表达.用含cIFN-γ基因的重组腺病毒处理MDCK细胞,可明显地抑制犬细小病毒在细胞中的增殖,表明构建的重组腺病毒具有明显的抗犬细小病毒的活性.结论]构建了含cIFN-γ基因的重组腺病毒,并证明该重组病毒在体外具有明显的抗犬细小病毒的活性.
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| 关 键 词： | 干扰素-γ 腺病毒载体 抗病毒活性 犬细小病毒 |
| 收稿时间： | 2012/4/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/7/21 0:00:00 |
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