蛋白质N端豆蔻酰化修饰的基因工程表达偶联加工系统 |
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引用本文: | 段治军, 陈长征, 杨新颖, 李伯良, 王德宝,.蛋白质N端豆蔻酰化修饰的基因工程表达偶联加工系统[J].生物工程学报,1996,12(Z1). |
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作者姓名: | 段治军 陈长征 杨新颖 李伯良 王德宝 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物化学研究所; |
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摘 要: | 对酵母NMT基因在大肠杆菌中表达进行较详细的研究,进而构建了复制子为p15A并含卡那霉素抗性基因的相容性表达质粒pKZMT,将其与表达质粒pCZmCα1共转化进大肠杆菌BL21(DE3)F′,进行双质粒表达偶联加工修饰研究,其中pCZmCα1表达底物蛋白小鼠cAMP依赖的蛋白激酶催化亚基α(PKA-mCα)。SDSPAGE及Westernblot分析表明,双质粒表达系统中,PKA-mCα都得到了稳定的高表达,尤其在23℃低温诱导表达时,表达产物的可溶性部分明显增多;而酵母NMT被控制在有利于活性功能的可溶性低水平表达。[3H]myristicacid标记测定及放射自显影的结果显示,在大肠杆菌中表达的重组PKA-mCα被豆蔻酰化修饰。
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关 键 词: | 蛋白质N端豆蔻酰化 PKAmCα 偶联表达 双质粒系统 |
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