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| 昆虫神经毒素LqhIT2的表达、抗血清制备及活性分析 | |
| 作者姓名： | 李洪波 夏玉先 |
| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院基因工程研究中心,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆400030 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 根据毕赤酵母密码子偏爱性,不改变毒素蛋白质一级结构,设计合成了昆虫神经毒素LqhIT2基因,并分别克隆至大肠杆菌融合表达载体pPET30-a( )和毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K.在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物经镍亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,制备了特异性较高的抗血清,抗体滴度超过1:128 000.利用制备的抗血清,采用斑点杂交,筛选得到了较高水平分泌表达重组LqhIT2的酵母转化子,摇瓶条件下,毒素表达量约9 mg/L.大肠杆菌表达产物没有生物活性,酵母表达产物经注射蝗虫表现出杀虫活性. |
| 关 键 词： | 昆虫神经毒素 抗血清 |
| 收稿时间： | 2008-02-26 |
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