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长叶红砂液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的克隆及表达特性
作者姓名:董禄禄  秦晓春  党振华
作者单位:(1 内蒙古大学 生命科学学院 内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室,呼和浩特 010021;2 包头市园林科技研究所,内蒙古包头 014010)
基金项目:国家自然科学基金(31360063);内蒙古自治区高等学校创新研究团队发展计划(NMGIRT1401)
摘    要:为研究长叶红砂(Reaumuria trigyna)离子转运分子机制,利用RT-PCR和RACE技术,克隆到其液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(NHX1)的全长cDNA片段,命名为RtNHX1(NCBI序列号为KR919802)。结果表明:RtNHX1的cDNA片段全长2 622bp,开放阅读框1 662bp,5′非编码区509bp,3′非编码区451bp,编码553个氨基酸,推测分子量为60.91kD。该蛋白含有12个跨膜结构域,为疏水蛋白,与其他植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白NHX1的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR对其在NaCl胁迫下的表达检测显示,不同时间和不同浓度NaCl胁迫下,RtNHX1表达量变化均呈先升高后降低趋势,在100mmol/L NaCl胁迫6h和200mmol/L NaCl胁迫后达到最高,表达量分别超过或约是对照的3倍,一定程度反应出RtNHX1参与长叶红砂的盐胁迫应答,是该植物离子转运体系的重要元件。

关 键 词:长叶红砂  液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因  cDNA  实时荧光定量PCR  NaCl胁迫  表达特性
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