光滑球拟酵母中α-酮戊二酸脱氢酶系生理作用解析 |
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引用本文: | 张旦旦,刘立明,堵国成,陈坚.光滑球拟酵母中α-酮戊二酸脱氢酶系生理作用解析[J].微生物学报,2009,49(12). |
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作者姓名: | 张旦旦 刘立明 堵国成 陈坚 |
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作者单位: | 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122 2. 江南大学食品科学与技术国家重点实验室,无锡,214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122 |
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基金项目: | ,国家杰出青年科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金 |
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摘 要: | 目的]研究α-酮戊二酸脱氢酶系在光滑球拟酵母碳代谢流、能量代谢和氨基酸代谢中的生理作用.方法]通过敲除光滑球拟酵母中编码α-酮戊二酸脱氢酶系中E1酶的基因kgd1,构建α-酮戊二酸脱氢酶活性缺失菌株T.glabrata kgd1::kan,并考察KGDH缺失引起TCA循环关键酶活性,碳代谢流量以及胞内氨基酸和能荷水平等方面的变化.结果]光滑球拟酵母中α-酮戊二酸脱氢酶活性的缺失导致:(1)细胞启动乙醛酸途径,通过形成TCA-乙醛酸循环实现TCA循环的正常代谢;(2)胞内NADH/NAD+水平下降33.7%,ATP/ADP水平下降31.8%,而与NADH代谢相关的丙酮酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性分别提高58.1%、33.3%和32.5%;(3)胞内丙酮酸含量下降50.1%,而胞内琥珀酸、苹果酸和α-酮戊二酸含量则分别增加了172.7%、66.1%和41.1%;(4)丙酮酸族氨基酸含量下降29.3%,而胞内谷氨酸族氨基酸和天冬氨酸族氨基酸含量则提高了34.7%和26.8%.结论]上述研究结果表明,α-酮戊二酸脱氢酶系在微生物细胞中心碳代谢、能量代谢和氨基酸代谢中发挥着重要作用.
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关 键 词: | α-酮戊二酸脱氢酶系 光滑球拟酵母 α-酮戊二酸 丙酮酸 |
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