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MAGE-3 DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察
引用本文:刘杏娥,孙晓东,吴金民.MAGE-3 DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察[J].生物工程学报,2004,20(2).
作者姓名:刘杏娥  孙晓东  吴金民
作者单位:浙江大学医学院附属邵逸夫医院;1.肿瘤中心;2.普外科,杭州 310016
摘    要:通过RTPCR方法扩增MAGE-3 cDNA,以pcDNA3.1+为载体,构建重组表达质粒pcDNA3-1/MAGE-3。重组质粒用脂质体转染鼠B16细胞,经RT-PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中MAGE-3的表达。以100μg质粒剂量肌肉注射接种小鼠,间隔10天,共3次,以空载体和PBS为对照。结果,重组质粒免疫的小鼠,其脾淋巴细胞对MAGE-3阳性靶细胞的杀伤活性为51.08±7.41%,与空载体组(8.44±1.89%)及PBS组(5.76±1.75%)相比,差异有显著性(P<0.01),而对MAGE-3阴性靶细胞的杀伤活性分别为8.21±1.65%,7.68±1.56%和5.13±1.42%,其差异无显著性;MAGE-3 DNA疫苗组免疫血清1∶15稀释时能检测到抗MAGE-3抗体,脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显升高,外周血中CD4+、CD8+T细胞也提高,小鼠肿瘤的生长速度明显减慢,与对照组相比,差异显著(P<0.01)。说明MAGE-3重组质粒免疫小鼠可以诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答。

关 键 词:MAGE-3,  真核表达,  DNA疫苗,  肿瘤,  免疫应答

Construction of Human MAGE-3 DNA Vaccine and Its Immune Effects Observed in vivo
Abstract:
Keywords:
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