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蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究
引用本文:房国梁,刘志国,宗义强,张大川,曾丽娟,付云洁,屈伸.蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究[J].生物技术通报,2009(9).
作者姓名:房国梁  刘志国  宗义强  张大川  曾丽娟  付云洁  屈伸
作者单位:1. 武汉工业学院生物与制药工程学院,武汉,430023
2. 华中科技大学同济医学院生化与分子生物学系,武汉,430030
摘    要:旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化.根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段.通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达系统pET-28a-c(+)上,转化大肠杆菌,获得表达菌株;IPTG诱导表达PGFB,经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化后偶联到琼脂糖凝胶6B上,用其纯化多克隆抗体.结果显示,PGFB在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后纯度达到90%以上,相对分子量为12.25 kD,与预期值相符.此外,偶联产物纯化多克隆抗体达到了良好的效果,每毫升基质可结合20 mg抗体.本研究克隆构建并高效表达了具有较好抗体亲和能力的PGFB,为多克隆抗体的快速纯化提供了方便.

关 键 词:蛋白G  IgG  Fc段结合域  多克隆抗体  原核表达

Cloning, Expression and Function of Protein G IgG Fc Binding Domain
Fang Guoliang,Liu Zhiguo,Zong Yiqiang,Zhang Dachuan,Zeng Lijuan,Fu Yunjie,Qu Shen.Cloning, Expression and Function of Protein G IgG Fc Binding Domain[J].Biotechnology Bulletin,2009(9).
Authors:Fang Guoliang  Liu Zhiguo  Zong Yiqiang  Zhang Dachuan  Zeng Lijuan  Fu Yunjie  Qu Shen
Abstract:
Keywords:
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