脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选* |
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引用本文: | 曹虹, 林琳, 刘北一, 陈丽丹, 杨军,.脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选*[J].微生物学通报,2006,33(5). |
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作者姓名: | 曹虹 林琳 刘北一 陈丽丹 杨军 |
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作者单位: | 1.南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室; 2.南方医科大学基础医学院免疫学教研室; 3.南方医科大学生物技术学院 广州; |
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摘 要: | 应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得
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关 键 词: | 噬菌体展示肽库 脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白 结合肽 亲和筛选 |
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