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桂花萜烯合酶(TPS)的生物信息学与原核表达分析
引用本文:曾祥玲,邹晶晶,王彩云.桂花萜烯合酶(TPS)的生物信息学与原核表达分析[J].广西植物,2019,39(5):624-632.
作者姓名:曾祥玲  邹晶晶  王彩云
作者单位:湖北科技学院核技术与化学生物学院,湖北咸宁437100;华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉430070;华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉,430070
基金项目:国家自然科学基金(31600569); 湖北省自然科学基金(2017CFB235); 湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20182802); 湖北科技学院博士启动基金(2016-19XB002); 咸宁市科技计划项目(XNKJ-1808); 大别山资源创新项目(2015TD02)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(31600569); Natural Science Foundation Program of Hubei Province(2017CFB235); Science and Technology Research Program of Hubei Provincial Department of Education(Q20182802); PhD Start-up Fund Program of Hubei University of Science and Technology(2016-19XB002); Science and Technology Plan Program of Xianning City(XNKJ-1808); Hubei Collaborative Innovation Center for the Characteristic Resources Exploitation of Dabie Mountains(2015TD02)]。
摘    要:挥发性萜烯类化合物是植物花和果实中重要的香气活性物质,萜烯合酶(TPS)的种类和功能决定物种中萜烯类物质的多样性。桂花作为重要的香花植物,萜烯类物质是其花香的重要成分,但有关桂花萜烯合酶的研究却并不多。为揭示桂花萜烯类物质的生物合成机理,该研究利用生物信息学分析了4个TPS蛋白的理化性质、亚细胞定位及其结构,在原核表达系统中进行4个TPS蛋白的体外表达,并对可溶性的TPS4重组蛋白进行了体外酶反应功能分析。结果表明:(1) 4个TPS蛋白的理化性质差异较小,但仅有TPS4蛋白定位于其他靶向,不含信号肽,延伸链的比例较低,在靠近氨基端的区域内不含延伸链。(2) 4个TPS蛋白在原核系统中均可成功表达,但仅有TPS4获得了可溶性重组蛋白。(3)将纯化的TPS4重组蛋白分别与GPP、NDP和FPP进行反应,均只检测到一种产物,分别为反式-β-罗勒烯、β-水芹烯和α-法呢烯。这为揭示植物萜烯类物质生物合成的分子机理提供了参考,对从蛋白水平研究桂花花香基因功能奠定了基础。

关 键 词:桂花  萜烯合酶  原核表达  花香
收稿时间:2018/12/21 0:00:00

Bioinformatic and prokaryotic expression analysis of terpene synthase(TPS)from Osmanthus fragrans
ZENG Xiangling,ZOU Jingjing,WANG Caiyun.Bioinformatic and prokaryotic expression analysis of terpene synthase(TPS)from Osmanthus fragrans[J].Guihaia,2019,39(5):624-632.
Authors:ZENG Xiangling  ZOU Jingjing  WANG Caiyun
Institution:1. School of Nuclear Technology and Chemistry & Biology, Hubei University of Science and Technology, Xianning 437100, Hubei, China; 2. Key Laboratory for Biology of Horticultural Plants, Ministry of Education, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China
Abstract:
Keywords:Osmanthus fragrans  terpene synthase(TPS)  prokaryotic expression  floral scent
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