| 抗人脂蛋白相关磷脂酶A2单抗制备及应用 |
| |
| 引用本文： | 许雯,陆兆新,曹林.抗人脂蛋白相关磷脂酶A2单抗制备及应用[J].生物工程学报,2019,35(3):482-491. |
| |
| 作者姓名： | 许雯 陆兆新 曹林 |
| |
| 作者单位： | 南京农业大学 食品科技学院，江苏 南京 210095,南京农业大学 食品科技学院，江苏 南京 210095,南京农业大学 食品科技学院，江苏 南京 210095 |
| |
| 摘 要： | 本研究旨在制备抗人脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)单克隆抗体,对单抗进行初步评价,采用免疫层析方法学,建立一种可在社区医疗机构应用的Lp-PLA2快速检测方法。首先从NCBI获得人Lp-PLA2全长基因序列构建表达载体,在CHO-K1细胞中表达Lp-PLA2重组蛋白。以获得的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术筛选杂交瘤细胞,小鼠腹水诱生单克隆抗体。通过SDS-PAGE、ELISA等方法评价抗体性能。利用双抗夹心法制备Lp-PLA2量子点荧光免疫层析检测试剂,并使用便携式检测仪器评估试剂性能。制备并筛选得到亲和力达到1×10~(–8)的配对单克隆抗体PLA1与PLA5,抗体亚类为IgG1,能特异性识别血液中Lp-PLA2蛋白。自制Lp-PLA2量子点荧光免疫检测试剂可检测线性范围为20–2000ng/mL,与进口试剂的检测相关系数R达到0.99。综上,本研究制备得到一对高亲和力、高特异性的抗人Lp-PLA2单克隆抗体,并建立了Lp-PLA2免疫层析检测方法,该方法检测准确、操作简便,适合Lp-PLA2检测应用于社区医疗机构,为居民心血管健康管理提供了新途径。
|
| 关 键 词： | 脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)，单克隆抗体，免疫层析，动脉粥样硬化，真核表达 |
| 收稿时间： | 2018/8/2 0:00:00 |
Development and application of monoclonal antibodies anti-human lipoprotein-associated phospholipase A2 |
| |
| Wen Xu,Zhaoxin Lu and Lin Cao.Development and application of monoclonal antibodies anti-human lipoprotein-associated phospholipase A2[J].Chinese Journal of Biotechnology,2019,35(3):482-491. |
| |
| Authors: | Wen Xu Zhaoxin Lu and Lin Cao |
| |
| Institution: | College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China,College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China and College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | lipoprotein-associated phospholipase A2 monoclonal antibody immunochromatography atherosclerosis eukaryotic expression |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|
