| 詹氏甲烷球菌DNA连接酶在大肠杆菌中的表达纯化及连接活性鉴定 |
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| 引用本文： | 张洋,谢响明,刘建华. 詹氏甲烷球菌DNA连接酶在大肠杆菌中的表达纯化及连接活性鉴定[J]. 生命科学研究, 2009, 13(2) |
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| 作者姓名： | 张洋 谢响明 刘建华 |
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| 作者单位： | 1. 北京林业大学生物科学与技术学院,中国,北京,100083
2. 上海交通大学生物科学与技术学院,中国,上海,200240 |
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| 摘 要： | 对一种耐热性古茵--詹氏甲烷球茵(Methanocaldococcus jannaschii)的DNA连接酶进行了克隆、表达、纯化,并对其生物化学特性和酶学活性进行了初步研究.詹氏甲烷球菌DNA连接酶重组蛋白在ATP及Mg<'2+>二价阳离子存在的条件下具有连接酶活性,能够封闭DNA链上的切割.通过不同温度下的测试,50～80℃为较适合连接温度,其耐热性强,甚至在90℃下加热5 min后仍有连接酶活性;其发挥活性的pH值范围比较宽泛.最适pH值为6.0～9.0.这是国际上对詹氏甲烷球菌DNA连接酶的首次报导.
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| 关 键 词： | 詹氏甲烷球茵 DNA连接酶 蛋白纯化 酶活分析 |
Expression, Purification and Enzymatic Characterization of a Thermostable DNA Ligase from Methanocaldococcus jannaschii |
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| ZHANG Yang,XIE Xiang-ming,LIU Jian-hua. Expression, Purification and Enzymatic Characterization of a Thermostable DNA Ligase from Methanocaldococcus jannaschii[J]. Life Science Research, 2009, 13(2) |
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| Authors: | ZHANG Yang XIE Xiang-ming LIU Jian-hua |
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| Affiliation: | ZHANG Yang1,XIE Xiang-ming1*,LIU Jian-hua2* (1. College of Biological Sciences and Biotechnology,Beijing Forestry University,Beijing 100083,China,2. College of Life Science & Technology,Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200240,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Methanocaldococcus jannaschii DNA ligase protein purification enzyme activity assay |
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