抗人类免疫缺陷病毒1型感染的双特异性抗体的构建及其功能研究

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)流行毒株的靶向广谱中和抗体(broadly neutralizing antibody,bNAb)的单一疗法最终会导致机体出现病毒逃逸突变,而基于bNAb开发的双特异性或多特异性抗体则表现出较好的中和效力和广谱性。根据已公布的单链可变区基因抗体序列,通过密码子优化后合成一种由单基因编码的双特异性抗体iMab-PGT151,经双酶切和测序对重组质粒进行了验证。酶联免疫吸附试验检测双特异性抗体的结合特异性,检测U87细胞裂解液中的荧光素酶活性以定量分析双特异性抗体对HIV-1假病毒的中和作用;间接免疫荧光染色法检测双特异性抗体iMab-PGT151对人喉癌上皮细胞的反应性;酶联免疫吸附试验检测该抗体对心磷脂的结合能力,验证其自体反应性。结果显示,构建的双特异抗体iMab-PGT151能够成功表达,可分别结合亲本抗体的各个配体,具有双特异性,能100%中和20株假病毒,IC 50值为0.084μg/mL。与亲本抗体相比,该抗体具有更强的中和效力和广谱度,无自体反应性,具有临床适用性。所构建的双特异性抗体iMab-PGT151将可能成为预防和治疗HIV-1感染的有效候选药物之一。