虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ单残基突变体R20A-HWTX-Ⅰ的化学合成与性质分析 |
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引用本文: | 王贤纯,梁宋平,罗泽民.虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ单残基突变体R20A-HWTX-Ⅰ的化学合成与性质分析[J].生物工程学报,2000,16(4). |
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作者姓名: | 王贤纯 梁宋平 罗泽民 |
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作者单位: | 湖南师范大学生命科学学院 长沙 410081;湖南农业大学生物技术系 长沙 410128 |
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摘 要: | 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(Huwentoxin-Ⅰ,HWTX-Ⅰ)是从虎纹捕鸟蛛(-Selenocosmia huwena)-的粗毒中分离出的一种多肽类神经毒素。为了探明该毒素分子中唯一的Arg残基与其生物学活性的关系,运用固相多肽合成技术和Fmoc化学直接构建了Ala取代HWTX-Ⅰ第20位Arg(R20)的突变体R20A-HWTX-Ⅰ;将合成的突变体置于含谷胱甘肽的缓冲体系中氧化复性后用反相和特殊设计的离子交换HPLC纯化,并对之进行氨基酸组成、Edman降解与质谱分析。活性测定结果表明,HWTXⅠ分子中的R20被A取代后,活性下降了92%,提示R20是与活性密切相关的重要残基。
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关 键 词: | 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ, 突变体,固相多肽合成,蛋白质工程,蜘蛛 |
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