| TNFalph 和 IL-1bet 靶点抗炎药物筛选细胞模型的构建 |
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| 引用本文： | 王星华,谭 琰,丁海敏,张 琦,华 茜.TNFalph 和 IL-1bet 靶点抗炎药物筛选细胞模型的构建[J].现代生物医学进展,2015,15(6):1005-1009. |
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| 作者姓名： | 王星华 谭 琰 丁海敏 张 琦 华 茜 |
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| 作者单位： | 北京中医药大学基础医学院;北京中医药大学中药学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81072901);教育部博士点基金项目(20120013110013);在读研究生资助项目(2014-JYBZZ-XS-029);在读研究生资助项目(2014-JYBZZ-XS-013) |
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| 摘 要： | 目的:构建两个高表达人TNFα和IL-1β细胞系,建立抗炎药物筛选细胞模型。方法:运用PCR的方法从载体pCMVSport-TNFα和p CMVSport-IL1β上扩增目的基因,以亚克隆方法将目的基因分别插入真核表达载体pcDNA3.1和pFLAG-CMV中,用单酶切、PCR扩增和基因测序的方法鉴定重组效果,然后将重组成功的质粒转入HEK293细胞系内,挑选能够稳定表达并遗传的单克隆细胞株,用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析其表达效果。结果:三种鉴定方法均显示重组质粒构建成功。Western blot结果显示,细胞株T3、T4均能较高表达炎症因子TNF-α;细胞株I2、I3、I5均能较高表达炎症因子IL-1β。结论:成功构建了TNFα和IL-1β靶标的药物筛选细胞模型,为筛选具有抗炎作用的中药提供了一个新平台。
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| 关 键 词： | 肿瘤坏死因子α 白介素1β 抗炎 药物筛选 稳定转染 |
Establishment of Drug Screening Model Targeting TNF-alpha and IL-1beta in Cells |
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| WANG Xing-hua;TAN Yan;DING Hai-min;ZHANG Qi;HUA Qian.Establishment of Drug Screening Model Targeting TNF-alpha and IL-1beta in Cells[J].Progress in Modern Biomedicine,2015,15(6):1005-1009. |
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| Authors: | WANG Xing-hua;TAN Yan;DING Hai-min;ZHANG Qi;HUA Qian |
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| Institution: | WANG Xing-hua;TAN Yan;DING Hai-min;ZHANG Qi;HUA Qian;School of Preclinical Medicine, Beijing University of Chinese Medicine;School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TNF-alpha IL-1beta Anti-inflammatory Drug screening Stable transfection |
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