小鼠3种α1,2岩藻糖转移酶基因的比较

利用RT-PCR方法克隆小鼠3种GDP岩藻糖：β-半乳糖苷α1，2-岩藻糖转移酶（α1，2-fucosyltansferase，α1，2-FT）基因编码区MFUT-Ⅰ、MHJT-Ⅱ、MFUT-Ⅲ，序列分析结果表明MFUT-Ⅰ、MFUT-Ⅱ和MFUT-Ⅲ间具有相当的同源性，且分别与人类H基因（78．4％）、Se基因（79．0％）和Secl基因（74．9％）具有序列同源性。将3种基因编码区分别插入表达载体pcDNA3．1的多克隆位点，并将其分别转染于COS-7细胞，结果显示MFUT-Ⅰ和MFUT-Ⅱ基因转染后的COS-7细胞具有α1，2-FT活性，但在MFUT-Ⅲ基因转染后的COS-7细胞中检测不到这种活性。应用Northern印迹杂交法研究基因在小鼠组织中的表达情况。证实MRJT-Ⅱ可在多种组织中产生3．5kb大小的mRNA转录产物，然而MFUT-Ⅰ和MFUT-Ⅲ分别只在附睾和睾丸中显著表达。Southern印迹杂交分析结果显示：基因MFUT-Ⅱ仅为一个拷贝，而MFUT-Ⅰ和MFUT-Ⅲ可能存在2个拷贝。因此，MHJT-Ⅰ、MFUT-Ⅱ和MFUT-Ⅲ分别为鼠的H基因、Se基因和Sec1基因。