| 基于颜色判定的环介导等温扩增技术检测HPV6和HPV16 |
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| 引用本文： | 芦春斌,罗乐,杨梦婕,聂凯,王淼,马学军.基于颜色判定的环介导等温扩增技术检测HPV6和HPV16[J].病毒学报,2011(1):64-70. |
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| 作者姓名： | 芦春斌 罗乐 杨梦婕 聂凯 王淼 马学军 |
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| 作者单位： | 暨南大学生殖免疫研究所;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室; |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目(2010B031600108); 传染病防治重大专项(2009ZX10004-101,2008ZX10004-002,001,004) |
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| 摘 要： | 建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的检测方法,即环介导等温核酸扩增技术(LAMP)应用于HPV6和HPV16亚型的检测。该技术设计分别对应于HPV6和16的E6和E7基因序列中6个区段的4条特异引物,在等温条件下(63℃)进行核酸扩增反应1h,在扩增前加入HNB染料(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,以HNB染料颜色的变化做为结果判定的标准,并经LA-320实时浊度仪和琼脂糖电泳证实。文中利用这种技术对13份已知的单重感染13种HPV不同亚型的临床样本进行了特异性分析,同时对2个含目的片段的克隆质粒的系列稀释物进行了灵敏度分析。结果显示LAMP方法特异性高,颜色法判断的灵敏度均为1000个拷贝DNA分子水平,比Real-time PCR低10～20倍,对62份宫颈刮片临床标本的HPV6和HPV16检出率和HPV分型试剂盒一致。因此,基于颜色判定的环介导等温扩增方法有望应用于人乳头瘤病毒HPV6和HPV16感染的快速筛选,具有在基层疾病预防控制中心和医院推广和应用的潜力。
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| 关 键 词： | 等温扩增 人乳头瘤病毒(HPV) |
Colorimetric Detection of HPV6 and HPV16 by Loop Mediated Isothermal Amplification |
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| LU Chun-bin,LUO Le,YANG Meng-jie,NIE Kai,WANG Miao,MA Xue-jun.Colorimetric Detection of HPV6 and HPV16 by Loop Mediated Isothermal Amplification[J].Chinese Journal of Virology,2011(1):64-70. |
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| Authors: | LU Chun-bin LUO Le YANG Meng-jie NIE Kai WANG Miao MA Xue-jun |
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| Institution: | LU Chun-bin1,LUO Le1,YANG Meng-jie1,NIE Kai2,WANG Miao2,MA Xue-jun2(1.Institute of Reproductive Immunology,Ji Nan University,Guangzhou 510632,China,2.State Key Laboratory for Genetic Engineering and Molecular Virology,National Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | loop mediated isothermal amplification human papillomavirus(HPV) |
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