| 一株γ-多聚谷氨酸生产菌的分离筛选与鉴定 |
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| 作者姓名： | 何剑 雍晓雨 周俊 王舒雅 陈怡露 郑涛 |
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| 作者单位： | 南京工业大学生物与制药工程学院;南京工业大学生物能源研究所; |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)(2013CB733904,2013CB7335002,2011CBA00807);国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA023406);江苏省自然科学基金(BK20130932);江苏省高校自然科学基金(13KJB530009) |
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| 摘 要： | 从菜园土壤中取样,在含有谷氨酸的筛选培养基上采用梯度稀释涂布、平板划线的方法,以菌落/菌液黏稠度为指示,分离筛选生产γ-多聚谷氨酸的菌株。利用氨基酸分析仪测定提取纯化后的γ-多聚谷氨酸的产量,并通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA基因序列分析鉴定该菌株,并对其合成γ-多聚谷氨酸的功能基因进行PCR扩增。结果表明:筛选到1株产γ-多聚谷氨酸的细菌C1,其液体摇瓶发酵产量为18.4 g/L,相对分子质量为1.8×106;该菌株为革兰氏阳性,菌落黏稠、菌体呈杆状、产芽胞、且形成荚膜;主要生理生化特点为能利用葡萄糖和蔗糖发酵,水解淀粉,H2O2酶阳性,产吲哚等;经16S rDNA鉴定与Bacillus amyloliquefaciens ATCC23350同源性为100%,故命名为Bacillus amyloliquefaciens C1,且拥有γ-多聚谷氨酸合成的相关基因pgsA、pgsB和pgsC。
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| 关 键 词： | 解淀粉芽胞杆菌 鉴定 分离筛选 γ-多聚谷氨酸 |
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