| 抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究 |
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| 引用本文： | 张秀敏,史琪琪,林慧,王军伟,李增山.抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究[J].现代生物医学进展,2011,23(23):4401-4404. |
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| 作者姓名： | 张秀敏 史琪琪 林慧 王军伟 李增山 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室 陕西西安710032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目("863"计划)，国家自然科学基金，西安市攻关计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:对MAGE1-MAGE3-HSP70(M1-M3-HSP70)融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究,为后期的临床前试验提供数据和依据。方法:以本实验室构建的菌种(BL21(DE3)pLysS-M1-M3-HSP70)为材料,采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达,用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳、免疫印迹(Western blotting)对目的蛋白进行分析,然后确定盐析条件,使用ButylSepharose HP疏水相互作用层析以及阴离子交换(Source 30Q填料)对目的蛋白的纯化进行分析。结果:M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后,目的蛋白分为两部分,一部分为包涵体形式(44.9%),一部分为可溶表达(55.1%)。对其可溶部分进行研究发现,细菌裂解后,目的蛋白存在聚合和降解现象;确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围,基本确定了目的蛋白的纯化工艺。结论:明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质,确定了目的蛋白的纯化方法,为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考。
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| 关 键 词： | 融合蛋白 聚合 降解 稳定 |
The Basic Study and Purification Strategy of MAGE-1/MAGE-3/Heat Shock Protein 70 Fusion Protein Tumor Vaccine |
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| ZHANG Xiu-min,SHI Qi-qi,LIN Hui,WANG Jun-wei,LI Zeng-shan.The Basic Study and Purification Strategy of MAGE-1/MAGE-3/Heat Shock Protein 70 Fusion Protein Tumor Vaccine[J].Progress in Modern Biomedicine,2011,23(23):4401-4404. |
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| Authors: | ZHANG Xiu-min SHI Qi-qi LIN Hui WANG Jun-wei LI Zeng-shan |
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| Institution: | △(Department of Pathology,Faculty of Basic Medicine,Fourth Military Medicine University,Xi’ an 710032,China.) |
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| Abstract: | |
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