| 三角褐指藻△5-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及在酿酒酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 杨哲,魏东盛,邢来君,李明春. 三角褐指藻△5-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及在酿酒酵母中的表达[J]. 生物工程学报, 2009, 25(2) |
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| 作者姓名： | 杨哲 魏东盛 邢来君 李明春 |
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| 作者单位： | 南开大学微生物学系分子微生物学与技术教育部重点实验室,天津,300071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，教育部博士点基金新教师项目 |
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| 摘 要： | ![]()
△5-脂肪酸脱氢酶是合成花生四烯酸的关键酶.根据已报道的△5-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从三角褐指藻基因组DNA和总cDNA中扩增得到1520 bp和1410 bp的特异片段,序列分析结果显示,结构基因中含有一个大小为110 bp的内含子,这是国内外首次报道.将△5-脂肪酸脱氢酶基因亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2.0中,在大肠杆菌中筛选到含有目的片段的重组质粒pYPTD5,用电击转化的方法将重组质粒pYPTD5转化到营养缺陷型酿酒酵母菌株INVSc1中,在缺省培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YPTD5,在合适的培养条件下,添加外源底物双高γ-亚麻酸和诱导物半乳糖,培养并收集菌体.通过脂肪酸甲酯气相色谱分析,表明三角褐指藻△5-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中获得了高效的表达,将双高γ-亚麻酸转化为花生四烯酸,其底物转化率达到了45.9%.
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| 关 键 词： | 花生四烯酸 酿酒酵母 功能验证 |
Cloning and expression in Saccharomyces cerevisiae of AS-fatty acid desaturase gene from Phaeodactylum tricornutum |
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| Zhe Yang,Dongsheng Wei,Laijun Xing,Mingchun Li. Cloning and expression in Saccharomyces cerevisiae of AS-fatty acid desaturase gene from Phaeodactylum tricornutum[J]. Chinese journal of biotechnology, 2009, 25(2) |
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| Authors: | Zhe Yang Dongsheng Wei Laijun Xing Mingchun Li |
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| Abstract: | ![]()
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