| 利用基因捕获技术建立稳定表达HBV的细胞模型 |
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| 引用本文： | 何云燕,谭畅,李毅,黄爱龙,汤华.利用基因捕获技术建立稳定表达HBV的细胞模型[J].中国生物工程杂志,2007,27(2):24-28. |
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| 作者姓名： | 何云燕 谭畅 李毅 黄爱龙 汤华 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学 重庆医科大学 重庆医科大学 |
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| 摘 要： | pGEM-HBV1.3质粒经HindIII限制性内切酶消化，将HBV1.3全长DNA切下，与同样经HindIII限制性内切酶降解过的PU21连接，得到PU21-HBV重组质粒。将该重组质粒采用电击转染方法导入HepG2细胞中，G418筛选阳性克隆并以X-gal染色，RT-PCR、Southern blot等方法验证HBV DNA的插入和表达。 PU21-HBV重组质粒经测序证明HBV1.3全长DNA正确与PU21载体连接，该重组质粒转染HepG2细胞后经G418筛选，得到一系列阳性克隆， Southern blot证实HepG2细胞基因组中含HBV DNA，RT-PCR结果表明HBV DNA在HepG2细胞中有功能基因的转录。HBV1.3已被整合在HepG2细胞染色体中并能稳定表达其RNA。稳定的HBV表达细胞模型构建成功。HBV表达细胞模型的建立，为进一步研究相关基因对HBV的转录、复制、转录后调节以及HBV各种蛋白的表达机理研究提供实验材料。
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| 关 键 词： | PU21基因捕获载体 乙型肝炎病毒(HBV) 表达 |
| 收稿时间： | 2006-10-12 |
| 修稿时间： | 2006年10月12 |
Construction of a human liver carcinoma cell line that stable expression of HBV with gene trap vector |
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| HE Yun-yan,TAN Chang,LI Yi,HUANG Ai-long,TANG Hua.Construction of a human liver carcinoma cell line that stable expression of HBV with gene trap vector[J].China Biotechnology,2007,27(2):24-28. |
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| Authors: | HE Yun-yan TAN Chang LI Yi HUANG Ai-long TANG Hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PU21 gene trapping vector HBV Expression |
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