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| 非连续多核苷酸定点突变的方法 | |
| 引用本文： | 王易伦, 张平武, 戴建新, 郭瀛军, 陆德如,.非连续多核苷酸定点突变的方法[J].生物工程学报,1996,12(Z1). |
| 作者姓名： | 王易伦 张平武 戴建新 郭瀛军 陆德如 |
| 作者单位： | 第二军医大学分子遗传教研室; |
| 摘 要： | 以人粒巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ-ＣＳＦ）、人α８干扰素（ｈＩＦＮ-α８）和分裂细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的ｃＤＮＡ定点突变为例，建立了一种新的大区域非连续多核苷酸同步定点突变的方法。经碱变性后的质粒ＤＮＡ，先用突变引物延伸单链，然后通过ＰＣＲ扩增得到突变双链ＤＮＡ。用该方法成功地改造了ｈＧＭ-ＣＳＦ基因５′端３６个核苷酸中的９个位点、ＩＦＮ-α８基因５′端３９个核苷酸中的９个位点和ＰＣＮＡ基因ＳＤ顺序两侧６个和７个核苷酸。与经典的含Ｕ单链寡核苷酸定点突变方法相比，本方法突变效率高，并省去了对突变克隆杂交筛选的操作 |
| 关 键 词： | 基因 定点突变 PCR |
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