| 尘螨变应原Der f1 真核表达载体的构建及转染CHO 细胞 |
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| 作者姓名： | 彭江龙崔玉宝 钱士匀裴华陈年根 黄幼生 |
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| 作者单位： | 1. 海南医学院,海南海口,571101
2. 盐城卫生职业技术学院,江苏盐城,224006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30860261) |
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| 摘 要： | 目的:构建尘螨变应原Der f1真核表达载体,转染真核细胞并进行蛋白表达.方法:根据Genebank中Der f1基因的核酸序列(AB034946),设计引物,采用PCR法,从保存的JM109工程菌中扩增Der f1编码基因,克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/myc-hisA上,以脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选,进行稳定表达细胞株的筛选和鉴定.结果:将目的基因Der f1成功连接到pcDNA3.1/myc-hisA-Derf1并转染CHO细胞,获得稳定表达的CHO细胞株.结论:成功构建了尘螨变应原Der f1真核表达载体,并转染CHO细胞表达蛋白质.
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| 关 键 词： | 尘螨 Der f1基因 真核转染 CHO细胞 |
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