| 用于FK506类小分子化合物筛选的细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 肖鹤,于鸣,李松,沈倍奋,黎燕.用于FK506类小分子化合物筛选的细胞模型的建立[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(10):895-901. |
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| 作者姓名： | 肖鹤 于鸣 李松 沈倍奋 黎燕 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
2. 军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目（973）（2003CB515508）. |
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| 摘 要： | 建立FKBP12/Fas双聚体可诱导细胞凋亡生物效应的细胞模型，为FK506类小分子化合药物的初步筛选提供一个可应用的技术平台.首先利用RT-PCR方法钓取人源性Fas胞浆区基因，测序鉴定正确后，插入到载体pC4M-FV2E中，构建pC4M-FV2E/Fas表达质粒.然后将Myr-FKBP12-Fas融合基因从pC4M-FV2E/Fas质粒克隆进pEGFP-N1中.最后将重组质粒pEGFP-N1/FKBP12-Fas转染进HEK293细胞,并利用G418筛选融合基因FKBP12-Fas稳定表达的细胞株.实验结果显示，阳性化合物AP20187作用4～6 h后,稳定转染的靶细胞发生凋亡，基因组呈现典型的“DNA Ladder”,而FKBP12的天然结合蛋白FK506可竞争性地阻断这种阳性药物诱导的细胞凋亡.研究提示：所构建的细胞模型,可用于以FKBP12为靶标、基于FK506空间构型设计合成的FK506类小分子化合药物的初步筛选.
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| 关 键 词： | 融合表达，细胞模型，细胞凋亡，竞争抑制 |
| 收稿时间： | 2004/4/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2004/6/30 0:00:00 |
Establishment of a Cell Model Based on FKBP12 Dimerization for Screening of FK506-like Small Molecular Compounds |
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| XIAO He,YU Ming,LI Song,SHEN Bei-Fen and LI Yan.Establishment of a Cell Model Based on FKBP12 Dimerization for Screening of FK506-like Small Molecular Compounds[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2004,31(10):895-901. |
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| Authors: | XIAO He YU Ming LI Song SHEN Bei-Fen and LI Yan |
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| Institution: | Institute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Pharmacology and Toxicology, Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China;Institute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fusion expression cell model apoptosis competitive assays |
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