重组人TGF-β3的表达纯化及复性研究 |
| |
作者姓名: | 宋江南 李校堃 苏志坚 吴志玲 黄亚东 |
| |
作者单位: | 1. 暨南大学药学院, 广州 510632;
2. 暨南大学医药生物技术研究开发中心, 广州 510632;
3. 温州医学院药学院, 温州 325035 |
| |
基金项目: | 国家“973”计划资助项目(G1999054204) |
| |
摘 要: | 利用大肠杆菌表达重组人转化生长因子β3(humantransformgrowthfactor,hTGFβ3),目的蛋白以包涵体形式表达。用8mol/L尿素溶解的包涵体蛋白,经CMSepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可获得纯度达90%以上的rhTGF-β3单体。将单体蛋白加到复性缓冲液(1mol/LNaCl,0.5mol/LLArg,0.5mmol/LGSSG,30mmol/LCHAPS,20%(v/v)DMSO)进行复性后,再经DEAESepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可分离得到纯度达94%的二聚体rhTGFβ3,纯化后的产量为720mg/L,纯化总回收率为47%。MTT法测活表明,该重组蛋白具刺激成纤维细胞Balb/c3T3生长的作用。
|
关 键 词: | 重组人TGF-β3 包涵体 纯化 复性 |
收稿时间: | 2005-08-22 |
修稿时间: | 2005-08-222005-10-11 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《中国生物工程杂志》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国生物工程杂志》下载全文 |
|