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重组人TGF-β3的表达纯化及复性研究
作者姓名:宋江南  李校堃  苏志坚  吴志玲  黄亚东
作者单位:1. 暨南大学药学院, 广州 510632; 2. 暨南大学医药生物技术研究开发中心, 广州 510632; 3. 温州医学院药学院, 温州 325035
基金项目:国家“973”计划资助项目(G1999054204)
摘    要:利用大肠杆菌表达重组人转化生长因子β3(humantransformgrowthfactor,hTGFβ3),目的蛋白以包涵体形式表达。用8mol/L尿素溶解的包涵体蛋白,经CMSepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可获得纯度达90%以上的rhTGF-β3单体。将单体蛋白加到复性缓冲液(1mol/LNaCl,0.5mol/LLArg,0.5mmol/LGSSG,30mmol/LCHAPS,20%(v/v)DMSO)进行复性后,再经DEAESepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可分离得到纯度达94%的二聚体rhTGFβ3,纯化后的产量为720mg/L,纯化总回收率为47%。MTT法测活表明,该重组蛋白具刺激成纤维细胞Balb/c3T3生长的作用。

关 键 词:重组人TGF-β3  包涵体  纯化  复性  
收稿时间:2005-08-22
修稿时间:2005-08-222005-10-11
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