| 油菜叶绿体基因组同源重组片段的克隆及phb基因定点整合载体的构建 |
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| 引用本文： | 张中林,李轶女,苏宁,沈桂芳,张景昱,宋艳茹.油菜叶绿体基因组同源重组片段的克隆及phb基因定点整合载体的构建[J].植物生理与分子生物学学报,2001,27(3):235-242. |
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| 作者姓名： | 张中林 李轶女 苏宁 沈桂芳 张景昱 宋艳茹 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院生物技术研究所,
2. 中国科学院植物研究所, |
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| 摘 要： | 利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点，根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料，设计合成引物，PCR扩增并克隆了油菜叶绿体两个重要的功能基因rbcL和atpB（GenBank登录号分别为AF267640和AF267641），并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体的强启动子PpsbA和Prrn等驱动PHB合成途径中3个关键酶基因phbA、phbB和phbC，分别构建表达盒，并将它们按照其在原始菌株中的自然转录顺序phbC-phbA-phbB相串联，最后连同选择标记基因aadA表达盒一起，克隆到油菜叶绿体同源片段中，构建成phb基因定点整合载体pRCABZ和pRCABF。酶切及Southern杂交结果证明所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。
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| 关 键 词： | phb基因，叶绿体转化，同源片段，定点整合，油菜 |
| 修稿时间： | 2000年7月21日 |
Cloning of Homologous Targeting Sequences Containing Chloroplast Genes, rbcL and atpB, of Brassica napus and the Construction of Plastid Transformation Vectors Harboring Key Enzyme Genes Responsible for PHB Biosynthesis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phb genes chloroplast transformation homologous targeting sequence site-specific integration Brassica napus |
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