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荧光素酶mRNA的构建及电穿孔介导的mRNA体内表达特性北大核心CSCD
引用本文:樊玲江,周克茹,刘艳光,王桂芹,石婷,胡轶红,李代禧.荧光素酶mRNA的构建及电穿孔介导的mRNA体内表达特性北大核心CSCD[J].生物工程学报,2022,38(9):3379-3389.
作者姓名:樊玲江  周克茹  刘艳光  王桂芹  石婷  胡轶红  李代禧
作者单位:上海理工大学 健康科学与工程学院, 上海 200093;中科南京生命健康高等研究院, 江苏 南京 211135;上海交通大学 生命科学与生物技术学院, 上海 200240;中国科学院上海巴斯德研究所, 上海 200031;上海理工大学 健康科学与工程学院, 上海 200093;人工智能研究中心 鹏程实验室, 广东 深圳 518055
基金项目:上海交通大学微生物代谢国家重点实验室开放课题(MMLKF21-11);江苏省创新能力建设计划(BM2020019)
摘    要:为构建一种非复制型mRNA平台并探究电穿孔介导的mRNA对小鼠健康状况的影响及蛋白的表达情况,以荧光素酶作为靶标基因,用T7 RNA聚合酶体外转录及酶法加帽加尾的策略制备mRNA,用活体基因导入仪通过电穿孔的方式体内递送mRNA,借助小动物活体成像系统观测荧光素酶蛋白在小鼠体内的表达强度和持续时间。结果表明,使用该非复制型mRNA平台得到的mRNA成功在体内外表达,电穿孔介导的mRNA对小鼠健康体征无明显影响,所有的小鼠均成功表达了荧光素酶蛋白,蛋白表达在电穿孔后第1天达到峰值,在第4天迅速下降,但蛋白表达强度和持续时间存在较大的小鼠个体间差异。研究对非复制型mRNA的构建及其应用于疫苗或肿瘤药物研发具有重要参考价值。

关 键 词:电穿孔  mRNA  活体成像  荧光素酶
收稿时间:2021/12/2 0:00:00

Preparation of luciferase-expressing mRNA and expression characteristics of mRNA delivered by electroporation in vivo
FAN Lingjiang,ZHOU Keru,LIU Yanguang,WANG Guiqin,SHI Ting,HU Yihong,LI Daixi.Preparation of luciferase-expressing mRNA and expression characteristics of mRNA delivered by electroporation in vivo[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(9):3379-3389.
Authors:FAN Lingjiang  ZHOU Keru  LIU Yanguang  WANG Guiqin  SHI Ting  HU Yihong  LI Daixi
Institution:School of Health Science and Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China;Nanjing Advanced Academy of Life and Health, Nanjing 211135, Jiangsu, China;School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China;Institut Pasteur of Shanghai, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; School of Health Science and Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China;Peng Cheng Laboratory, AI Research Center, Shenzhen 518055, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:electroporation  mRNA  in vivo imaging  luciferase
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