| 以Zeocin Candida抗性基因为选择标glycerinogenes记的遗传转化 |
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| 引用本文： | 陈献忠,饶志明,沈微,方慧英,王正祥,诸葛健.以Zeocin Candida抗性基因为选择标glycerinogenes记的遗传转化[J].激光生物学报,2008,17(2):176-180. |
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| 作者姓名： | 陈献忠 饶志明 沈微 方慧英 王正祥 诸葛健 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育重点实验室,江苏无锡214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (30570142) |
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| 摘 要： | 为从分子水平上阐释产甘油假丝酵母（Candida glverinogenes）高产甘油机理，建立一种方便可行的遗传转化系统是十分必要的。与G418和潮霉素等抗生素相比，Zeoein抗生素对C．glycerinogenes具有较低的致死浓度。以pGAPZb作为构建整合载体的骨架，以Zeocin抗性基因作为选择标记，以URA3基因作为整合位点，构建了C．glycerinogenes整合载体pGA-CU。整合载体经过限制酶线性化后用作转化载体，基于电击转化的方法成功获得了抗Zeocin的转化子并经过PCR分析进一步确证。通过优化电击转化的参数，获得了较为稳定的转化效率，基于这一技术的转化效率每微克DNA可获得120个转化子。为进一步研究该菌株的遗传背景和代谢机理奠定了基础。
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| 关 键 词： | 产甘油假丝酵母 遗传转化系统 电击转化 整合质粒 |
| 收稿时间： | 2007/5/6 |
A Transformation System for Candida glycerinogenes, Based on Zeocin Resistance |
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| Abstract: | 作者简介：诸葛健(1939-),男,教授,博导.(电话)86-510-85918109;(电子信箱)jianzhuge@hotmail.com,通讯作者 |
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