| 用suc2信号肽捕获系统筛选小鼠胚胎cDNA文库基因 |
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| 作者姓名： | 孙强 黄红艳 周鹏 冯蕾 秦红 韩骅 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学遗传学与发育生物学教研室,西安,710032
2. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,唐都医院干细胞研究中心,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目资助 (项目编号 :2 0 0 1CB5 0 990 0,子课题编号 :0 0 1CB5 0 990 6)~~ |
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| 摘 要： | PCR扩增 1 1d小鼠胚胎cDNA文库插入片段 ,将 0 .5～ 2 0kb的扩增产物插入筛选载体的多克隆位点 ,转化suc2基因缺陷酵母宿主菌 .然后将约 1 0 5个酵母菌落接种于选择性平板上进行筛选 ,得到了 1 82个可在选择性培养基上生长的菌落 .PCR扩增显示 ,插入片段大小分布于 0 1～ 1 5kb之间 .对其中 1 4个阳性菌落的重组子进行序列测定 ,分别代表 6种不同的基因序列 ,与报告基因都有正确的读框内融合 .其中两种基因序列反复被筛到 ,分别命名为spt1、spt2 .spt1 [gi:2 772 876 6 ],可能以非编码RNA的身份参与蛋白质向细胞外分泌的过程 ,而spt2编码多个连续的赖氨酸 ,可能通过非经典途径介导蛋白质的分泌
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| 关 键 词： | cDNA文库筛选 非编码RNA 蛋白质分泌 |
| 收稿时间： | 2004-08-20 |
| 修稿时间： | 2003-09-16 |
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