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地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质
引用本文:张蔚文,焦瑞身.地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质[J].微生物学报,1996,36(3):199-207.
作者姓名:张蔚文  焦瑞身
作者单位:中国科学院上海植物生理研究所;中国科学院上海植物生理研究所 上海
摘    要:采用原生质体裂解方法确定甲基丙二酰CoA变位酶(MCM)和消旋酶(MCR)均是胞浆内酶。各经过四步纯化得到电泳纯酶。纯化MCM酶的比活力为12.84u/mg,纯化倍数为528,酶活回收为60%,纯化的MCM酶服从典型的米氏底物饱和曲线,对琥珀酰CoA和辅酶B_(12)的K_m值分别为9.723#mol/L和0.1277#mol/L。经SephadexG-150测定MCM分子量约为134.000±2000,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条分子量分别为67000和65000的蛋白带,说明该酶由两个大小不等亚基组成。吸收光谱测定每摩尔纯化全酶含两摩尔辅酶B_(12)。纯化MCR酶比活力为2.305u/mg,纯化倍数96,酶活回收46.7%。MCR酶由两个分子量均为17500的亚基组成。MCR酶活性能被二价金属离子Cu2+、Co2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+所促进。两酶的酶学性质和其他生物来源的MCM、MCR酶明显相似。

关 键 词:地中海拟无枝酸杆菌    甲基丙二酰CoA变位酶    消旋酶    纯化    酶学性质

PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF METHYLMALONYL-CoA MUTASE AND METHYLMALONYL- CoA RACEMASE FROM A RIFAMYCIN SV-PRODUCING AMYCOLATOPSIS MEDITERRANEI U32
Zhang Weiwen Jiao Ruishen.PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF METHYLMALONYL-CoA MUTASE AND METHYLMALONYL- CoA RACEMASE FROM A RIFAMYCIN SV-PRODUCING AMYCOLATOPSIS MEDITERRANEI U32[J].Acta Microbiologica Sinica,1996,36(3):199-207.
Authors:Zhang Weiwen Jiao Ruishen
Abstract:
Keywords:A  mediterranei U32  Methylmalonyl-CoA mutase  Methylmalonyl-CoA racemase  Purification  Characterization    
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