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芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆、表达和酶学性质分析
引用本文:彭平,吴襟,程安春,高启禹,张树政.芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆、表达和酶学性质分析[J].微生物学报,2005,45(6):876-880.
作者姓名:彭平  吴襟  程安春  高启禹  张树政
作者单位:1. 中国科学院微生物研究所,北京,100080;四川农业大学,雅安,6250143
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100080
3. 四川农业大学,雅安,6250143
4. 中国科学院微生物研究所,北京,100080;甘肃农业大学,兰州,730070
基金项目:中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2_SW_323)~~
摘    要:在仔猪结肠内容物中分离出一株能利用淀粉的芽孢杆菌Bacillussp.WS06,构建了全基因组DNA文库,从中筛选出α_淀粉酶基因amyF,分析测定了其核苷酸序列并进行了表达;其中amyF编码的蛋白有526个氨基酸、分子量为58.6kD;它与已报道的Bacillusmegaterium的α_淀粉酶序列有93%的同源性。经过氨基酸序列比较分析还发现,AmyF含有淀粉酶家族中4个高度保守的酶催化活性区。经多步纯化,重组酶的比活共提高了22.2倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品;经SDS_PAGE检测,AmyF酶分子量为57kD。该酶的最适反应温度为55℃~60℃,酶的最适反应pH为7.0,在温度不超过55℃时,酶活较稳定;AmyF能迅速降解淀粉生成麦芽寡糖,属于内切糖苷酶。

关 键 词:芽孢杆菌  α-淀粉酶  基因克隆和表达  酶学性质
文章编号:0001-6209(2005)06-0876-05
收稿时间:2005-03-14
修稿时间:2005-07-29
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