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头孢菌素C酰化酶突变位点的研究
引用本文:徐雪丽,张伟,刘艳,谢丽萍,胡又佳.头孢菌素C酰化酶突变位点的研究[J].中国生物工程杂志,2015,35(2):59-65.
作者姓名:徐雪丽  张伟  刘艳  谢丽萍  胡又佳
作者单位:1. 中国医药工业研究总院张江分院 上海 201203; 2. 上海医药工业研究院 上海 200437
基金项目:国家“十二五”重大新药科技专项(2011ZX09203-001-06);上海市科委科技支撑项目(1343100204)资助项目
摘    要:头孢菌素C酰化酶能直接将头孢菌素C(CPC)转化为7-氨基头孢烷酸(7-ACA),此一步酶法具有很大的经济价值,所以得到很多研究者的关注,特别是提高CPC酰化酶活性及专一性的研究。以CPC酰化酶基因ecs50为基础,利用重叠延伸PCR,对文献报道的活性提高的突变体酶S12的6个位点分别进行突变,将得到的6个突变体V122A、G140S、F297N、I314T、I415V、S710L进行诱导纯化后,检测酶活,以此来研究不同突变位点对酶活力的影响。结果 V122A的比活为106U/mg,它的转化效率比初始酶提高23.7%。

关 键 词:CPC酰化酶  重叠延伸PCR  酶活  头孢菌素C  7-氨基头孢烷酸  
收稿时间:2014-11-11

Study on Mutations of Cephalosporin C Acylase
XU Xue-li;ZHANG Wei;LIU Yan;XIE Li-ping;HU You-jia.Study on Mutations of Cephalosporin C Acylase[J].China Biotechnology,2015,35(2):59-65.
Authors:XU Xue-li;ZHANG Wei;LIU Yan;XIE Li-ping;HU You-jia
Institution:XU Xue-li;ZHANG Wei;LIU Yan;XIE Li-ping;HU You-jia;China State Institute of Pharmaceutical Industry Zhangjiang Institute;Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry;
Abstract:
Keywords:CPC acylase  Overlap extension PCR  Enzyme activity  Cephalosporin C  7-aminocephalosporanic acid  
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