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黄瓜叶片胞间隙蛋白质双向电泳体系的建立
引用本文:董从娟,李玉红,林梓浩,陈 鹏.黄瓜叶片胞间隙蛋白质双向电泳体系的建立[J].西北植物学报,2013,33(1):183-189.
作者姓名:董从娟  李玉红  林梓浩  陈 鹏
作者单位:1. 西北农林科技大学园艺学院,陕西杨陵,712100
2. 西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨陵,712100
基金项目:国家自然科学基金(31071791);西北农林科技大学基本科研业务费专项资金(QN2009011)
摘    要:以黄瓜种质‘PI088’幼苗为材料,提取胞间隙液,制备蛋白样品,通过对不同IPG胶条、等电聚焦条件、分离胶浓度、上样量等条件的探索,建立适合黄瓜叶片胞间隙蛋白质组的双向电泳体系.结果显示:(1)用pH 3~10的非线性IPG胶条,等电聚焦时间为70 000 Vh,分离胶浓度为10%,上样量为800 μg时,能够得到较好的2-DE图谱.(2)利用所建立的双向电泳体系找到了对照及接种霜霉菌后2d的黄瓜叶片胞间隙差异蛋白,其中的12个上调表达点和10个下调表达点的表达量变化在1.5倍以上.并选取一个差异点成功进行了质谱分析.(3)质谱分析结果显示,所找的差异点为一种酸性的几丁质酶,等电点为4.27.可见,采用所建立的双向电泳体系可获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱并能很好地用于质谱分析.

关 键 词:黄瓜  叶片  细胞间隙液  双向电泳

Construction of Protein Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis System for Intercellular Washing Fluid of Cucumber Leaves
DONG Congjuan,LI Yuhong,LIN Zihao,CHEN Peng.Construction of Protein Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis System for Intercellular Washing Fluid of Cucumber Leaves[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2013,33(1):183-189.
Authors:DONG Congjuan  LI Yuhong  LIN Zihao  CHEN Peng
Institution:1 College of Horticulture,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 College of Life Sciences,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:cucumber  leaves  intercellular washing fluid  two-dimensional electrophoresis
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