影响火炬松胚性悬浮细胞原生质体的胚胎发生的因素(英文)

火炬松（ＰｉｎｕｓｔａｅｄａＬ．）是我国亚热带和部分热带地区最重要的绿化和造林树种。它的生长周期长，杂合程度高，难以用常规的杂交方法进行品种改良。建立火炬松的原生质体胚胎发生体系，有可能、进而以遗传转化为基础进行火炬松等针叶树的品种改良。本研究以湖南省绍阳市的火炬松成熟种子为材料，建立胚性细胞悬浮系。将其培养至对数生长期，用１％ＲＳ、２．５％Ｒ１０和０．２％Ｙ２３的酶混和液分离原生质体，活力达９０％以上（Ｆｉｇ．１）。纯化原生质体，在再生培养基上培养２天后，细胞壁再生（Ｆｉｇ．２）；；６天后，６５％的原生质体第１次分裂（Ｆｉｇ．３）；培养３周后，形成小细胞团（Ｆｉｇ．４）；６周后，形成大细胞团（Ｆｉｇ．５）；８周后，形成胚性胚柄细胞团（ＥＳＭ）（Ｆｉｇ．６）；１０周后，形成早期体细胞胚（ＥＳＥ）（Ｆｉｇ．７）；１２周后，形成后期体细胞胚（ＬＳＥ）（Ｆｉｇ．８）火炬松原生质体胚形成过程中的关键结构是ＥＳＭ，ＥＳＥ和ＬＳＥ。它们形成的最佳基本培养基是１．２５ＬＰ培养基。再生培养基中高浓度的ＢＡ和低浓度的肌醇有利于ＥＳＭ的形成，但不利于ＥＳＥ和ＬＳＥ的形成。反之，低浓度的ＢＡ和高浓度的肌醇不利于ＥＳＭ的形成，

Studies on Parameters Affecting Embryogenesis of Protoplasts Isolated from Suspension of Embryogenic Cells in Loblolly Pine