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前列腺素脱氢酶在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定
引用本文:李美宁,解军,常冰梅,张悦红,殷云勤,程牛亮. 前列腺素脱氢酶在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2008, 28(5): 41-45
作者姓名:李美宁  解军  常冰梅  张悦红  殷云勤  程牛亮
作者单位:山西医科大学生物化学与分子生物学教研室 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室
摘    要:15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH)属于抑癌基因,在多种肿瘤中表达缺失,在肿瘤的发生发展中起着重要作用。提取人正常大肠黏膜组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到PGDH基因的编码序列,克隆入原核表达载体pBV220,测序鉴定正确后转化E.coli DH5α,经温控诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot,证实为相对分子质量约为29000的PGDH-His6蛋白,表达产物以包涵体形式存在,3h诱导表达量最高,约占菌体总蛋白的30%。经Ni2+配体亲和层析纯化得到纯度大于95%的目的蛋白。重组PGDH简单复性后具有一定的生物活性,约为3.7×104U/mg,为下一步研究其在肿瘤中的作用奠定了基础。

关 键 词:大肠癌  15-羟基前列腺素脱氢酶  克隆  原核表达  
收稿时间:2007-11-30
修稿时间:2007-11-29

Expression Purification and Identification of 15-Hydroxyproglandin Dehydrogenase Gene in Escherichia coli
LI Mei-ning,XIE Jun,CHANG Bing-mei,ZHANG Yue-hong,YIN Yun-qin,CHENG Niu-liang. Expression Purification and Identification of 15-Hydroxyproglandin Dehydrogenase Gene in Escherichia coli[J]. China Biotechnology, 2008, 28(5): 41-45
Authors:LI Mei-ning  XIE Jun  CHANG Bing-mei  ZHANG Yue-hong  YIN Yun-qin  CHENG Niu-liang
Abstract:
Keywords:colorectal cancer  15-hydroxyproglandin dehydrogenase (PGDH)  gene clone  gene expression
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